柱层析法制取冻鹅肝中卵磷脂的相关研究

　　柱层析法是一种效率较高的分离技术，它在冻鹅肝卵磷脂分离纯化方面得到了广泛的应用。在层析柱内装有吸附剂，它是分离的固定相，它是由基质和表面活性官能团组成，基质是不会与目的产物和杂质结合的化学惰性物质，活性官能团会有选择地与目标产物或杂质产生结合。当移动相中的溶质通过固定相时，不同溶质成分与活性基团的解吸力和吸附力不同，使它们在柱内产生不同的移动速度，故可将目标产物分离。其具有一定缺点:处理量少，并且不能连续操作。但据近期报道，国外能利用计算机来控制每次循环中的加料、展层、鉴定等操作。

　　在层析法中，常用的填料有三氧化二铝、硅藻土、二氧化硅、二氧化锰及硅胶等，其中，硅胶和硅藻土可再回用，而氧化铝柱不容易再回用。硅胶按其活性可分为活性硅胶和减活性硅胶，一般常用中性硅胶。常用的洗脱剂有正己烷，三氯甲烷和低级醇及它们的混合液等。这些洗脱剂不但含有损害物，而且给工业化生产带来困难。为了达到较佳分离效率，须对柱层析条件如:柱的几何形状、填充方法、填充物颗粒大小、柱温、上样量、洗脱液的组成、流速等因素进行优化选择。

　　文献报道中，柱层析法纯化磷脂采用氧化铝较好。我国剂品生物制品检定所用层析法提取冻鹅肝中的卵磷胎，用氯仿溶解纯化的CdC2-卵磷脂复合物，使用氧化铝层析的方法纯化卵磷脂，用提纯卵磷脂样品替换较纯的卵磷脂，制成抗原做非密螺旋体试验，试验结果表明，两种抗原反应表现出相符性，证明经层析法纯化所得卵磷脂可以进行非密螺旋体的检测试验。研究人员用层析法精制鹅肝卵磷脂得到纯度为91%的卵磷脂。并研究了氧化铝柱层析法分离鹅肝磷脂中卵磷脂，指出以三氧化二铝为固定相，用单一乙醇溶剂进行洗脱，分离得到含量达到90%左右的卵磷脂，而且所用试剂没损害，产品安全。为层析法分离纯化的工业化生产提供了可行性依据，为纯度较高的卵磷脂产品的制取提供了一定的试验基础。

　　冻鹅肝通常情况下用氧化铝和硅胶作为磷脂的吸附剂，乙醇溶解粗磷脂，将此溶液通过以氧化铝为填料的层析柱，利用氧化铝对卵磷脂、脑磷脂和肌醇磷脂的吸附能力不同的性质，当用乙醇淋洗层析柱时，脑磷脂、肌醇磷脂和中性油等基本不被淋洗，被洗下来的是卵磷脂，因此可得含量高于95%的卵磷脂。